产品说明： 
生物体内巯基主要包括谷胱甘肽巯基和蛋白质巯基。前者不仅能够修复氧化损伤的蛋白质，而 且参与活性氧清除，后者对于维持蛋白质构象具有重要作用。通过测定总巯基含量和 GSH 含量，能 够间接测定蛋白质巯基含量。 巯基基团与 5,5’-二硫代-双-**苯甲酸（DTNB）反应，生成黄色化合物，在 412nm 处有最大吸 收峰。 
自备实验用品： 天平、研钵、恒温水浴锅、可见分光光度计/酶标仪、微量玻璃比色皿/96 孔板和蒸馏水。 
 
操作步骤： 
一、样品的制备： 
（1） 动物、植物组织：称取约 0.1g，加入 1mL 的提取液，制备成 10%的匀浆，8000g，常温离心 10min，取上清待测。 
（2） 血清，培养液：直接测定。 
二、测定步骤： 
1、 分光光度计或酶标仪预热 30min 以上，调节波长至 412nm，蒸馏水调零。 
2、 操作表 
 
对照管
测定管
标准管
空白管
样品（μL）
40
40
 
 
标准品（mL）
 
 
40
40
试剂一（μL）
150
150
150
150
试剂二（μL）
 
10
10
 
H2O（μL）
10
 
 
10
混匀，25℃静置 10min， 1cm 光径玻璃比色皿，双蒸水调零，测定 412nm 吸光值，ΔA=A 测定-A 对照。
 
计算公式 
总巯基标准曲线：y = 1.7236 x，R 2 = 0.9994 
1. 组织： 
（1）按样本质量计算 
总巯基含量（μmol/g）= 1.7236 DA ×V 反总÷ (V 样÷V 样总×W)=2.9×ΔA÷W 
（2）按样本蛋白浓度计算 
总巯基含量（μmol/mg prot）= 1.7236 DA ×V 反总÷(V 样×Cpr)=2.9×ΔA÷Cpr 
2. 血清、培养液： 
总巯基含量（μmol/L）= 1.7236 DA ×V 反总÷V 样×103 =2900×ΔA V 反总：反应总体积，1mL；V 样：反应中样品体积，0.2mL；V 样总：加入提取液体积， 1mL； W：样品质量，g ；Cpr：样本蛋白浓度，mg/mL；103 ：1mmol/ L=103 μmol/ L 
 
注意事项 最低检出限为 10μ mol/L